Министерство здравоохранения Российской Федерации ЯРОСЛАВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ 150000, г. Ярославль, ул. Революционная, 5 Телефон (0852) 30 - 56 - 41 Факс (0852) 30 - 50 - 13 ____________№ ______________ На _________________от  |  | YAROSLAVL MEDICAL ACADEMY 5, Revolutsionnaya st., YAROSLAVL, 150000, Russia Tel. (0852) 30 - 56 - 41 Fax (0852) 30 - 50 - 13
|
ОТЧЕТИзучение бифидогенного и антибактериального действия концентратов лактулозы и препаратов, содержащих лактулозу
На кафедре микробиологии Ярославской государственной медицинской академии проведено экспериментальное изучение развития популяций различных видов микроорганизмов в присутствии препаратов, содержащих лактулозу. Экспериментально исследованы препараты, содержащие лактулозу, выпускаемые под торговыми марками «ЛАКТОФАН», «БИФИДОФАН», «ЛАКТУСАН» и «Лактовит».
ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ - В экспериментах in vitro изучить влияние препаратов с лактулозой на рост бифидобактерий.
- В экспериментах in vitro изучить влияние препаратов с лактулозой на развитие популяций убиквитарных микроорганизмов.
- Исследование цитопатогенного действия препаратов с лактулозой на модели культуры клеток.
- В экспериментах in vitro изучение влияние препаратов, содержащих лактулозу, на ферментативную активность лизоцима.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В работе использованы препараты: - «Лактофан»;
- «Бифидофан»;
- «Лактусан»;
- «Лактовит»;
чистые культуры микроорганизмов: - Bifidobacterium bifidum;
- Staphylococcus aureus;
- Staphylococcus epidermidis;
- Escherichia coli;
- Pseudomonas aeruginosa;
- Bacillus subtilis;
- Bacterium cereus;
- Lactobacillus plantarum;
- бактерии рода Proteus;
- Candida albicans;
искусственные питательные среды: - среда Эндо;
- мясопептонный агар;
- молочно-желточно-солевой агар;
- кровяной агар;
- среда Блаурокка;
- среда Сабуро;
- мясопептонный бульон.
Изучение развития популяций микроорганизмов проводилось с использованием методов количественных посевов и турбидиметрического метода, интенсивность роста оценивали по изменению мутности взвеси и определения КОЕ на мл. В работе использованы полуперевиваемые культуры клеток:
- Нер-2 – культура клеток эпителиальной карциномы человека
- RD – культура клеток рабдомиосаркомы человека.
Лизоцимная активность определялась нефелометрическим методом по отношению к культуре Micrococcus luteus методом, разработанным О.В. Бухариным (1992). РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Изучение влияния препаратов лактулозы на развитие популяции микроорганизмов in vitro.
В культуральную среду вносили изучаемые препараты в концентрации 10 процентов, изучаемые микроорганизмы засевались в количестве 0,1 мл 2 млд. взвеси бактерий отдельных видов, посевы инкубировали при 37С, в контрольный образцах отсутствовали препараты лактулозы. Интенсивность развития бактериальных популяций оценивали фотонефелометрическим методом по степени изменения мутности 24 часовой культуры.
А. Изучение влияния препаратов лактулозы на развитие бифидо- и лактобактерий.
Добавление в среду «Бифидофана» в наибольшей степени повышало интенсивность развития бифидобактерий, что может быть связано с увеличением посевной дозы. Мутность взвеси увеличивалась до 0,96 при значениях в контроле – 0,41. Наряду с этим, в присутствии «ЛАКТОФАНА», «ЛАКТУСАНА» и «ЛАКТОВИТА» наблюдалось увеличение интенсивности развития популяции бифидо- и лактобактерий (показатели мутности взвеси составляли соответственно 0,72, 0,64, 0,83).
Таким образом, лактулоза изученных препаратов обладает способностью увеличивать интенсивность развития популяций бифидо- и лактобактерий, «Бифидофан» обладает более выраженным бифидогенным действием.
Б. Изучение влияния препаратов лактулозы на развитие популяций убиквитарных микроорганизмов.
Установлено, что «ЛАКТОФАН» снижает интенсивность развития популяции S.aureus (показатель мутности 0,47, в контроле – 1,45), микроорганизмов рода Proteus (в опыте – 0,06, в контроле – 0,15), Ps. aeruginosa (в опыте – 0,1, в контроле – 0,15), грибов рода Candida (в опыте – 0.14, в контроле – 0,16). Повышает интенсивность размножения Е.coli (в опыте показатель мутности – 0,17, в контроле – 0,1).
«Бифидофан» увеличивает интенсивность размножения кишечной палочки (соответственно от 0,1 до 1,2) и снижает интенсивность развития популяций стафилококка, микроорганизмов рода Proteus и грибов рода Candida.
«ЛАКТУСАН» не изменяет интенсивность развития Е.coli и существенно уменьшает интенсивность роста грибов рода Candida, стафилококков и протея.
«ЛАКТОВИТ» увеличивает развитие кишечной палочки (мутность культуры – 0,41, в контроле – 0,18), снижает рост стафилококков (0,26 в опыте, 1,45 – в контроле), микроорганизмов рода Proteus (в опыте – 0,4, в контроле – 1,01).
Таким образом, интенсивность развития условно-патогенных микроорганизмов в присутствии изученных препаратов лактулозы существенно уменьшается, что может иметь практическое значение в направленной нормализации микрофлоры кишечника при дисбактериозах с помощью данных препаратов лактулозы. Использование данных препаратов может позволить увеличить в кишечнике число кишечных палочек и уменьшить интенсивность размножения патогенных микроорганизмов.
Исследование развития культур клеток в присутствии образцов лактулозы.
Характер действия был однотипен при изучении всех четырех препаратов:
- при добавлении препаратов в культуральную среду существенного изменения монослоя культуры клеток не наблюдалось;
- через 24 часа наблюдалось изменение цвета среды за счет изменения реакции среды в кислую сторону при добавлении препаратов «БИФИДОФАНА» и «ЛАКТОФАНА». Морфологических изменений монослоя клеток не наблюдалось.
Таким образом, препараты лактулозы не обладают цитопатическим и цитотоксическим действием.
Исследование влияния препаратов лактулозы на ферментативную активность лизоцима. Изучена лизоцимная активность коммерческого препарата «лизоцима» в присутствии различных концентраций препаратов (5%, 10%, 15%, 20%). Установлено, что препараты в концентрации 5% повышают ферментативную активность лизоцима. Более активен в этом отношении «БИФИДОФАН». Повышение концентрации препаратов до 10–15% не влияет на лизоцимную активность, увеличение концентрации до 20% снижает активность фермента.
ВЫВОДЫ
- Препараты лактулозы повышают интенсивность развития популяции бифидобактерий in vitro.
- Рост и размножение популяции лактобактерий в присутствии препаратов лактулозы увеличиваются.
- Препараты лактулозы увеличивают интенсивность размножения популяции Е.соli.
- В присутствии препаратов лактулозы снижается интенсивность развития стафилококков, грибов рода Candida, микроорганизмов рода Proteus и Ps.aeruginosa.
- Препараты лактулозы не обладают цитопатическим действием.
- В присутствии препаратов лактулозы усиливается ферментативная активность лизоцима, отмечается дозозависимый эффект.
- Активность препаратов различна. Более выраженный бифидогенный эффект, увеличение интенсивности роста Е.соli, подавление развития убиквитарных бактерий, усиление ферментативной активности лизоцима наблюдаются у препаратов «БИФИДОФАНА» и «ЛАКТОВИТА».
- Препараты «ЛАКТУСАН», «БИФИДОФАН», «ЛАКТОВИТ», «ЛАКТОФАН» могут быть использованы для лечения дисбиотических сдвигов в составе микрофлоры организма, в нормализации аутомикрофлоры, для усиления антагонистической активности представителей нормальной микрофлоры против патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, повышают неспецифическую резистентность организма, усиливая активность лизоцима.
Профессор кафедры микробиологии с иммунологией и вирусологией Ярославской государственной медицинской академии доктор медицинских наук,
член-корр. РАЕ
| |  | Э.В. Малафеева | |